品红亚硫酸钠培养基用途:用于水中大肠菌群的分离或确证试验。
原理:乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和矿物质;乳糖为可发酵的糖类;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色,发酵乳糖的细菌产生乙醛,与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。
配方:
每升蛋白胨:10克酵母膏粉、5克牛肉
品红亚硫酸钠培养基有毒吗
没有。品红亚硫酸钠培养基是用于分子生物学中的培养,其原理是蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂,因此是没有毒的。培养基有天然、人工两种,品红亚硫酸钠培养基是实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。
大肠菌群检测用的品红亚硫酸钠培养基为什么培养基
大肠菌群检测用的品红亚硫酸钠培养基,主要由蛋白胨、乳糖、亚硫酸钠、碱性品红和琼脂等制作。蛋白胨为基础营养物质提供氮源,乳糖为可发酵的碳水化合物,亚硫酸钠和品红可抑制革兰氏阳性菌的生长,琼脂是凝固剂。乳糖发酵的细菌产生乙醛,在碱性品红下,乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落。
大肠菌在品红亚硫酸钠培养基上的典型特征是怎么样的
品红亚硫酸钠培养基用于水中大肠菌群的分离或确证试验。
原理:
乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。蛋白胨、酵母膏粉、牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和矿物质乳糖为可发酵的糖类琼脂是培养基的凝固剂磷酸氢二钾为缓冲剂亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色,发酵乳糖的细菌产生乙醛,与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。
配方(每升):
蛋白胨 10g
酵母膏粉 5g
牛肉膏粉 5g
乳糖 10g
琼脂 15g
磷酸氢二钾 3.5g
无水亚硫酸钠5g
碱性品红 1g
最终pH 7.2±0.2
使用方法:
1、 称取本品54.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,115℃高压灭菌20min,冷至50℃左右,倾注无菌平皿,备用。
2、 滤膜灭菌:将孔径为0.45μm的滤膜放入烧杯中,加入蒸馏水或去离子水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤2-3次,以除去残留溶剂。
3、 滤器灭菌:用点燃的酒精棉球,火焰灭菌。也可用121℃高压灭菌20min。
4、过滤水样:用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将100mL水样(如水样含菌较多,可减少过滤水样量,或将水样稀释)注入滤器中,打开滤器阀门,负0.5大气压下抽滤。
5、 培养:水样抽滤完后,再抽气约5S,关上滤器阀门,取下滤器,用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分,移放在品红亚硫酸钠培养基上,滤膜截留面向上,滤膜应与培养基完全贴紧,两者间不得留有气泡,然后将平皿倒置,放入36±1℃恒温箱内培养22-24h。
6、 观察结果:挑出符合下列特征菌落进行革兰氏染色、镜检。
紫红色,具有金属光泽的菌落。
深红色,不带或略带金属光泽的菌落。
淡红色,中心色较深的菌落。
如何配制碱性品红亚硫酸钠琼脂培养基
先将琼脂溶解,然后加入亚硫酸钠,磷酸氢二钾蛋白胨等,同时加热,再用脱脂棉过滤。最后在过滤的溶液中加乳糖。。我觉得你说的沉淀试剂上时琼脂没溶解完全的现象,琼脂不用完全溶解,过滤的作用就是把没有完全溶解的琼脂粉除去,使培养基更清澈。
相关推荐: