1、需求长时间保存的血清有必要贮存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间切勿超越1个月，由于血清结冰时体积会添加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留必定体积空间,否则易发作污染或玻璃瓶冻裂。
2、热灭活是指56℃, 30分钟加热已彻底冻结的血清，加热过程中须规矩摇晃均匀，此热处理的意图是使血清中的补体成分(complement)灭活，除非有必要,一般不主张作此热处理,由于热处理会形成血清沉积物明显增多,并且还会影响血清的质量，补体参加反响有:细胞毒效果, 滑润肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板开释组胺, 增强吞噬效果, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。
3、瓶装血清冻结需选用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天，然后移入室温,待全部溶解后再分装，在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与成分均一,削减沉积的发作，切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,这样因温度改动太大,简单形成蛋白质凝聚而呈现沉积。
血清保存方法？
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时山陆会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP 为标记的ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合，使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤迅唯掘，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装亩核冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂
血清的保存注意事项
血清的保存应该注意以下几点：
（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超源坦过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
（2）热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成指槐血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡）,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
（4）雹逗桐一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
（5）血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下小黑点:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象小黑点,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
（6）切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.
血清样本加甘油的保存条件
血清样本加甘油的拿咐迅保存方法如下：
将血清分装入不含胶原蛋白的离心管中；
加入10%甘油溶液，终消此浓度为5%；
用标签标记样本信息，并轻轻摇匀离心管；
将样本保存在-20℃的低温冰箱中。
在使用该方法保存血清样本时，甘油的作用主要是增加样本的稳定性，同时可以保护样本中的蛋白质不被降解，延长样本保存时间。甘油还可以防简塌止细胞膜的破裂和血红蛋白的析出，从而保持血清的完整和透明度。
需要注意的是，加甘油的血清样本保存条件要求比较严格，如果样本保存的温度不够低或保存时间过长，可能会影响样本的质量和稳定性。因此，在保存血清样本时，一定要按照上述方法进行操作并及时放置于低温冰箱中。
血清多少度保存
血清零下20度可以保存一年，零下80可以保存1－2年，最好的办法冻干，裤滑可以保存十年甚至更长时间。
血清是指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某胡老腊些含模保护作用。
检验技师考点：抗血清的保存
(1)经签定合格后的抗血清，以1：100比例加入1%的硫柳汞或5%的叠氮钠，使其最后浓度分别为0.01%或0.05%.
(2)用无菌滴管将抗血清分装小管，每管装1ml左右。
(3)-20℃以下保存，可保存2年以上。
(4)如有条件可将血清冷冻干燥保存于4℃以下，保存时间更久。
制备：
1、动物的选择
羊、马、鸡、猴、豚鼠，都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。
2、抗陵迅原制备
1)抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜(一般可不加青、链霉素)次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。
免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的让哪免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次，大鼠为100～200μg/次，兔为100μg ～1 mg/次，合成免疫原为2 mg(半抗原约为20～200μg)，一般需要与等量的'福氏完全佐剂混合。加强免疫的剂量为首次计量的1/2，通常用不坦汪码完全福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法;反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。
2)佐剂和抗原乳剂的配制
1佐剂的配制：福氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant)，各实验室的配方不尽相同，我室采用的配方如下：
医用液体石腊 20毫升
羊毛脂 12克
水浴溶化、混匀，分装于青霉素小瓶，用纱布、线绳扎紧瓶塞。8磅20分钟灭菌，4℃保存备用。于免疫前准备抗原乳剂制备时，以活卡介苗(有时亦用死卡介苗)代替死结核菌，每毫升试剂中加入10mg活卡，即为福氏完全佐剂。
2抗原乳剂的制备：其方法一般有两种，其一，将等量的完全佐剂(注意佐剂必须预先加热融化，但不超过50℃)和抗原溶液分别吸入两个5ml注射器内，在两个注射器的12# 针头间套上一根长约8～12cm的医用无毒塑料管，将两个注射器连接在一起(塑料管必须先经酒精浸泡消毒，使用时取出，用灭菌生理盐水冲洗后，与注射器针头相连接，塑料管与针头的口径须合适，不能松，稍紧些为宜)，针头插进塑料管约1～2cm然后由两人相对而坐后缓缓推动针蕊，使管内溶液进入塑料管道至对侧注射器内，每次推动针蕊时必须把管内容物全部推出，另一侧也同样操作，使管内液体往返混合，直至形成油包水乳剂(Water-in-oil enulsion)为止。
其二是，将等量的佐剂和抗原溶液倒入钵内，经过反复碾磨，也可形成油包水乳剂，该法主要优点是快速，可靠，不足方面主要是由于粘附过多，浪费佐剂及抗原。
制成的乳剂是否形成油包水乳剂直接影响免疫效果，因此，必须进行质量检查，检查的方法是将制成的乳剂滴一滴在凉水(自来水)表面，质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整而不分散，不合格者进入水面后立即扩散，水面油亦逐渐扩大，这就必须要继续操作至质量合格为止。
但有时，由于佐剂的配制质量原因，很难乳化至合格，遇有这种情况，须考虑重新配制佐剂。
3、免疫途径，剂量和免疫周期
抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求，选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2～4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫;再以免疫原加IFA作2～5次加强免疫，每次间隔2～3周，皮下或腹腔注射加强免疫。
1)常规(皮内多点注射)免疫：
1第一次免疫：剂量为每只兔子注射1.0 ml抗原乳剂(含抗原量1～2mg)。注射部位为两只后脚掌的皮内各注射0.2 ml，其余0.6 ml分多点注入脊柱二侧，颈部，腹股沟和腋窝等处淋巴结附近部位皮内，每点可注入0.05ml，分12点注入。
2第二次免疫：初次免疫后20天左右，剂量为1.0ml/只(1～2 mg/ml)，加福氏不完全佐剂。注射部位在腹部皮下多点注射，每点注入0.1 ml。
3第三次免疫：再次免疫后两周内进行，注射剂量和部位同第二次免疫，免疫后7～14d抽取少许静脉血，分离血清，试血测定效价。
2)淋巴结免疫：主要优点是可减少用量。过程如下：
1卡价苗致敏：免疫前足掌皮下每侧各注入活卡价苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右观察两侧腘窝淋巴结，一般可肿胀如蚕豆大小，此时即可进行淋巴结内免疫注射。
2第一次免疫：用手指定淋巴结后在两侧腘窝淋巴结内各注入抗原乳剂0.25ml，每只兔总量0.5 ml;为加强免疫，于初次免疫20天后，于腹部皮下多点注射不加佐剂抗原溶液1mg/1ml。
3二周后可如同第一次免疫的剂量和途径再注射一次，一般可在第三次免疫注射前试血滴定效价，效价如已达到要求可不必进行第三次免疫。
有条件的情况下，免疫后要加强动物饲料管理，如给熟黄豆饲养等。
3)腹腔免疫：一般不必加佐剂，适用于细胞性或颗粒性抗原，而且抗原性较强者，例如用绵羊红细胞免疫家兔或小鼠即可用此法。
4、试血，测定抗体效价
一般在第三次免疫后7～10天即可于兔耳静脉或小鼠尾尖取少量血，分离出血清之后进行试血。
① 环状试验，较为经典的方法，目前较少采用，如与20μg/ml以下的抗原于30 min内能出现“艹”的沉淀环，即测定抗体效价达1：5000以上时为合格。
② 免疫双扩散法，这是最常用的试血方法，其具体方法是，中间孔加稀释的抗原(1mg/ml)10μl，周围孔顺时针方向加制备的抗血清分别为1:2, 1:4, 1:8，1:16，1:32和1:64，(用生理盐水或PBS稀释)。经37℃保温24h后观察结果，效价在1:16以上即可决定放血。
5、放血
经效价检查合格后即可放血。放血前动物应停食12 h，以减少血清中的脂肪含量。如拟保留该免疫动物，可直接由心脏取血，或切开耳缘静脉滴血或心脏穿刺取血。取血后由静脉缓缓注入等量5%葡萄溶液以补足失血量。取血的动物经2～3个月休息，可再次加强免疫后取血。如拟一次放血致死，可用颈动脉放血的方法，各种取血方法如下。
1)心脏取血：固定动物于仰卧位置，用食指探明心脏博动量高部位(在胸骨左侧，由下向上数第3与第4助骨之间，指兔)，剪去少许毛，用2.5% 碘酒和75%酒精消毒后，以9#针头在预定位置与胸部呈45。角刺入心脏，微微上下移动针头，待见血液进入针筒后，即将注射器位置固定取血。2.5公斤体重的家兔一次可取血20～30ml。
2)耳缘静脉滴血：先将耳缘静脉附近的毛剪去用无菌棉球将皮肤擦干净(不用酒精消毒，避免溶血)。用台灯照射耳部使血管因温度增高而扩张，然后用无菌刀片将耳缘静脉切一长0.5cm的纵切口，第一次切口应从耳尖部开始，以后再切时，逐步向耳根方向移动。用无菌试管或平皿收集流出的血液。如切口凝血，血流不畅时，可用无菌棉棒轻轻将切口外血凝块擦去(注意勿使切口损伤太大)，血流仍可继续流出，直至达到所需要的血量为止。取血后用无菌棉球压迫切口止血。耳缘静脉取血一次可取血50ml左右而动物不死。
3)颈动脉放血：使动物仰卧固定四肢，颈部剪毛、消毒后纵向切开前颈部皮肤长约10cm，用止血钳将皮肤分开夹住，剥离皮下组织，露出肌层，用刀柄加以分离，即见搏动的颈动脉。小心将颈动脉和迷走神经剥离长约5cm，选择血管中段，用止血钳夹住血管壁周围的筋膜。远心端用丝线结扎，近心端用动脉钳夹住，用酒精棉花球消毒血管周围，用无菌剪刀剪一V形缺口。取长2.5cm、直径为1.6mm塑料管一段，将一端剪成针头样斜面，并将此端插入颈动脉中，另一端放入200ml无菌三角瓶内，然后放开止血钳，血即流入三角瓶内，动物流血至死，2.5公斤家兔可放血80～100ml。
6、分离血清
必须在无菌条件下进行，待收集于平皿或三角瓶内的血液凝固之后，用无菌滴管在无菌环境(例如超净工作台)中把血块与瓶壁剥离后，放入37℃，1～2h取出后放入4℃过夜，使血清充分析出(不能冰冻，否则产生溶血)，经离心沉淀分出血清，放进低温冰箱保存。使用前必须经过签定合格后再分装保存备用。
含牛血清的培养基怎么保存
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、陪源脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的中春。
胎牛血清采用健康母牛怀孕的八月龄胎牛血液为原料，经无菌采集、分离、微孔过滤后而成。所以胎牛血清是品质也高，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。
胎牛血清保存方法：
1、需要长期保存卖乱耐的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会被破坏，而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶，可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
2、一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。
3、瓶装血清解冻需采用逐步解冻法-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温，待全部溶解后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
一般的培养液和酶.血清应当怎样储存
看样子你培养的动销氏物细胞.
培养液在4到8度避光保存.
酶（估计是消化酶）在-20度,分装成小份保存,避免反复冻容.
血清保存方式和酶一样.
如果你用量较大,可以将适量酶和血清放在4度,但这样宴斗凯晌唤保存要在1个月内用完.
血清送检冷冻还是冷藏
血清送检是冷藏，长期保存才是冷冻。
血清应保存在梁和-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时冷藏，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰橡吵盯当的灭菌容器内，再放回冷冻碰胡。
鸡血清如何保存
第一、先用微火加热到50摄氏度左右用洁净的餐具装好制冷
第二、用数洞保鲜袋密封
第三、保存致0摄氏度，结冰保存。
以上步骤最多只能保薯庆枯存两周左右的时间，时间差前长了会变味。有点甜味和腥味。
血清实验时候要注意哪些？血清滴在手上、桌子上或者其他地方该怎么办？
在实验室操作中要注意及处理方法：
血清保存: 建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于 4℃时，请勿超过一个月。若您 一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。
解冻血清的方法: 建议您将血清从冷冻箱取出后，先置于 2～8℃冰箱使之融解，然后在室温 下使之全融。但必须闷粗注意的是，融解过程中必须规则地启罩逗摇晃均匀。 3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 血清中沉淀物的出现有许多种原因， 但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成， 而血纤 维蛋白(形成凝血悄卖的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之 一。
但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以 400g 稍微离心,上清液即可接 着加入培养基内一起过滤。 我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物， 因为它可能会阻塞 您的过滤膜。
为什么要热灭活血清? 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组 胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养 ES 细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐 使用热灭活血清。
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