组成型表达载体的四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因。
表达载体就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件,使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点,其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因。
【求助/交流】什么是组成型表达载体
那这种载体的启动子有什么限制?一般是怎么构建的啊? 启动子就找宿主基因能够组成型表达的,不受任何条件比如高温诱导,金属调控之类的限制。比如植物中RBCS2 promoter等。至于怎么构建,你可以先看文献报导的一些现成的启动子,去扩出来。然后连在你要表达的目的基因前面就可以了。
组成型表达和诱导型表达
基因表达组成型:基因表达不受时期、部位、环境影响,没有时空特异性.而诱导型则是表达受到诱导物的调控.
采用组成型表达就是可以促使我们的基因不受限制的表达,可以一定程度上提高表达量;诱导型表达就可以人为的控制基因表达的时间点,可以有效的避免基因表达产物对宿主前期生长造成不利影响.
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